Evaluación de autoanticuerpos contra desmogleína - Consumibles Co., Ltd de la histología de Nantong

Scientific Reports volumen 13, Número de artículo: 5044 (2023) Citar este artículo

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Los autoanticuerpos contra la desmogleína-2 se han asociado con la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho (ARVC, por sus siglas en inglés) en personas. ARVC es una enfermedad común en el perro Boxer. Se desconoce el papel de los anticuerpos anti-desmogleína-2 en boxeadores con ARVC y la correlación con el estado o la gravedad de la enfermedad. Este estudio prospectivo es el primero en evaluar perros de varias razas y el estado de la enfermedad cardíaca en busca de anticuerpos anti-desmogleína-2. Los sueros de 46 perros (10 Boxers ARVC, 9 Boxers sanos, 10 Doberman Pinschers con miocardiopatía dilatada, 10 perros con enfermedad mixomatosa de la válvula mitral y 7 perros sanos que no son Boxer) se evaluaron para determinar la presencia y concentración de anticuerpos mediante transferencia Western y densitometría. Se detectaron anticuerpos anti-desmogleína-2 en todos los perros. La expresión de autoanticuerpos no difirió entre los grupos de estudio y no hubo correlación con la edad o el peso corporal. En perros con enfermedad cardíaca, hubo una correlación débil con la dilatación del ventrículo izquierdo (r = 0,423, p = 0,020), pero no con el tamaño de la aurícula izquierda (r = 0,160, p = 0,407). En ARVC Boxers hubo una fuerte correlación con la complejidad de las arritmias ventriculares (r = 0,841, p = 0,007), pero no con el número total de latidos ectópicos (r = 0,383, p = 0,313). Los anticuerpos anti-desmogleína-2 no fueron específicos de la enfermedad en la población de perros estudiada. La correlación con algunas medidas de la gravedad de la enfermedad requiere más estudio con poblaciones más grandes.

La miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho (ARVC, por sus siglas en inglés) es una enfermedad miocárdica hereditaria del perro Boxer que produce arritmias ventriculares, síncope, mayor riesgo de muerte súbita y, en algunos casos, dilatación ventricular y disfunción sistólica1,2,3. La fisiopatología y los cambios histopatológicos en ARVC son similares en el Boxer y en las personas4,5,6. Si bien los mecanismos específicos que conducen a la ARVC no se comprenden por completo, la disfunción de las proteínas desmosómicas a nivel del disco intercalado puede desempeñar un papel en la desestabilización de la integridad estructural y la interrupción de la conducción eléctrica del miocardio7,8. Una mutación autosómica dominante en el gen que codifica la estriatina, una proteína que se co-localiza en el disco intercalado y está asociada con proteínas desmosómicas, se ha asociado con el desarrollo de la enfermedad con penetrancia incompleta en perros Bóxer norteamericanos9. No todos los perros con la mutación desarrollan la enfermedad clínica, pero existe evidencia de que los mutantes homocigóticos pueden desarrollar un fenotipo más grave3,10. Además, los boxeadores negativos para la mutación de estriatina pueden desarrollar ARVC clínicamente significativo. Por lo tanto, las pruebas genéticas por sí solas no permiten una discriminación precisa entre Boxers sanos y afectados. En humanos, se ha demostrado que más de una docena de mutaciones en varias proteínas desmosómicas y un número menor de genes no desmosómicos desempeñan un papel en el desarrollo de ARVC11. A pesar de esto, en aproximadamente el 50% de los casos de ARVC humanos no se identifica una mutación genética12,13. Por lo tanto, el diagnóstico de ARVC tanto en humanos como en caninos sigue siendo un desafío. Actualmente, en los perros Boxer no existe un criterio universalmente aceptado para diagnosticar ARVC, pero el diagnóstico generalmente se realiza en función del número y la complejidad de la ectopia ventricular (EV) en el ECG ambulatorio de 24 horas (AECG) sin otra etiología para las arritmias o en el caso de un ventrículo izquierdo dilatado y poco contráctil sin otra etiología2,5.

Más recientemente, ha habido una investigación sobre un posible componente autoinmune de ARVC. Dos estudios evaluaron la presencia de autoanticuerpos en humanos con ARVC, y uno de ellos también evaluó una pequeña cohorte de perros Boxer14,15. En el primer estudio, realizado por Chatterjee et al., se encontraron autoanticuerpos contra la proteína desmosómica desmogleína-2 en casi todos los pacientes humanos con ARVC y estaban ausentes en casi todos los sujetos sanos y pacientes con miocardiopatía hipertrófica o miocardiopatía dilatada (MCD)14. Además, se identificaron anticuerpos anti-desmogleína-2 en 10/10 de los perros Boxer con ARVC y ausentes en su cohorte de perros de control. La carga de anticuerpos anti-desmogleína-2 se correlacionó positivamente con el número de latidos de VE y estuvo presente en pacientes sin una mutación genética de ARVC identificada en la cohorte humana estudiada. No se realizó una evaluación de si la densidad de anticuerpos se correlacionó con la gravedad de la enfermedad en la cohorte de Boxer. Por lo tanto, aún se desconoce si la presencia de autoanticuerpos podría servir como un indicador pronóstico además de tener un potencial diagnóstico en el Bóxer. Un segundo estudio de Caforio et al. evaluó una población más grande de humanos con ARVC, familiares afectados y familiares sanos para detectar la presencia de anticuerpos anti-corazón o anti-disco intercalado15. Mientras que la incidencia de anticuerpos anti-corazón y anti-disco intercalado fue mayor en pacientes con ARVC y familiares afectados, también se encontraron autoanticuerpos en familiares sanos, personas con otras enfermedades cardíacas no inflamatorias y donantes de sangre sanos con menor frecuencia16.

Hay una falta de investigación que evalúe el papel de la autoinmunidad en otras enfermedades cardíacas caninas comunes, con solo unos pocos estudios hasta la fecha. Se han documentado autoanticuerpos contra el receptor adrenérgico beta-1 tanto en humanos como en Doberman Pinschers con DCM17,18,19,20. Sin embargo, estos se consideran "anticuerpos funcionales" que se unen a los receptores acoplados a la proteína G, posiblemente induciendo un equilibrio metabólico alterado o estimulando condiciones patológicas21. Los anticuerpos anticardiacos clásicos que dan como resultado la destrucción de tejidos y la activación inmunitaria no se han estudiado en la MCD canina. Ningún estudio hasta la fecha ha evaluado ningún anticuerpo anticardiaco en perros afectados por la enfermedad cardíaca canina más común, la enfermedad mixomatosa de la válvula mitral (MMVD).

Los objetivos específicos de este estudio fueron determinar si los autoanticuerpos contra la proteína desmosomal desmogleína-2 están presentes en perros Boxer con ARVC y si son específicos de la enfermedad y/o de la raza evaluando también perros Boxer sanos, Doberman Pinschers con DCM, perros de razas pequeñas con MMVD y perros sanos no Boxer. Un objetivo secundario fue determinar si la expresión de estos autoanticuerpos se correlaciona con la gravedad de la arritmia encontrada en AECG y/o el grado de enfermedad estructural en la ecocardiografía. Planteamos la hipótesis de que la expresión de autoanticuerpos separaría a los perros con enfermedades cardíacas de los perros sanos, pero no sería específica de la enfermedad. También planteamos la hipótesis de que la expresión de autoanticuerpos se correlacionaría con la carga de arritmia y el grado de enfermedad cardíaca estructural.

De los 46 perros inscritos en el estudio, había 10 perros en los grupos de raza pequeña ARVC Boxer, DCM Doberman Pinscher y MMVD; 9 eran perros Boxer (HB) sanos y 7 eran perros no Boxer sanos (grupo C). Las características demográficas y clínicas de cada perro del estudio se muestran en la Tabla 1. Como se anticipó, debido a las asociaciones conocidas de raza y enfermedad, el peso corporal, la edad y las concentraciones de globulina diferían significativamente entre algunos de los grupos. Específicamente, el peso corporal difirió entre el grupo MMVD y todos los demás grupos (ARVC p < 0.0001; DCM p < 0.0001; HB p < 0.0001; sanos no boxeadores p = 0.0049), así como entre HB y sanos no boxeadores. grupo (p = 0,0219) y los grupos DCM y no boxeadores sanos (p = 0,0002). La edad difirió significativamente entre los grupos MMVD y no Boxer sanos (p < 0,0001), el grupo HB (p < 0,0001) y el grupo ARVC (p = 0,0108). La edad también difirió significativamente entre los grupos DCM y HB (p = 0,0296) y el grupo DCM y no Boxer sano (p = 0,044). La edad no difirió entre los grupos ARVC y HB (p = 0,1475). La única diferencia significativa en las concentraciones de globulina fue entre los grupos MMVD y los sanos no Boxer (p = 0,0074).

A nueve de los diez boxeadores con ARVC se les realizó al menos un AECG de 24 horas. El único Boxer (ARVC-9) sin un ECG ambulatorio (AECG) se presentó en la clínica con taquicardia ventricular sostenida refractaria al tratamiento médico y posteriormente fue hospitalizado y sacrificado humanitariamente. Los resultados de los nueve boxeadores con AECG realizados se muestran en la Tabla 2 junto con los medicamentos antiarrítmicos relevantes y los resultados de AECG previos en el momento del diagnóstico de ARVC, si se realizó.

Todos los boxeadores sanos tuvieron un ecocardiograma sin complicaciones y un ECG de superficie de 5 minutos, sin que se observara ectopia. En AECG de 24 h, los nueve boxeadores sanos tuvieron latidos ectópicos ventriculares únicos (VE) raros con una mediana de 2 latidos VE durante las 24 h (rango: 1-3 latidos). Todos los latidos de VE fueron aislados y todos los perros estaban libres de signos clínicos sin medicamentos. Nueve de los 10 Doberman Pinschers con DCM tenían arritmias auriculares o ventriculares en el momento de la recolección de la muestra. Un perro tenía fibrilación auricular concurrente mientras que los otros ocho tenían latidos VE, seis de los cuales justificaron una terapia antiarrítmica. Cuatro de los perros con MMVD tenían ectopia auricular ocasional concurrente. Ninguno de estos perros requirió AECG o terapia antiarrítmica. Todos los perros sanos que no eran Boxer tuvieron AECG de 24 horas normales.

Los autoanticuerpos séricos contra la desmogleína-2 en los perros se detectaron indirectamente mediante análisis de inmunotransferencia. La detección de desmogleína-2 recombinante se validó por primera vez utilizando anticuerpos anti-desmogleína-2 disponibles comercialmente en desmogleína-2 recombinante que se desnaturalizó, redujo y separó mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio, que reveló bandas claras en el peso molecular esperado de ~ 115 kDa. El aumento de la cantidad de carga de la proteína desmogleína-2 recombinante resultó en una mayor densidad de bandas y sirvió como control positivo (Fig. 1).

Western blot (recortado) de validación de la detección de la proteína recombinante desmogleína-2 mediante anticuerpos anti-desmogleína-2 disponibles en el mercado. Cada pocillo se cargó con una cantidad creciente (ng) de proteína desmogleína-2 recombinante en el mismo gel. La mancha original sin recortar se muestra en las figuras complementarias. S1 y S2.

El sondeo de desmogleína-2 recombinante con suero de perro diluido demostró que los autoanticuerpos contra desmogleína-2 estaban presentes en todos los perros, independientemente del estado de la enfermedad y la raza. Todas las muestras de suero dieron como resultado inmunodetección de la proteína recombinante al peso molecular esperado de ~ 115 kDa. Las bandas de proteínas fueron variables en su intensidad, pero claramente detectables. La Figura 2 muestra imágenes de Western blot representativas de dos perros en cada población de estudio.

Imágenes de Western blot representativas de dos perros de estudio de cada grupo, con el número de estudio encima del blot. Cada transferencia contiene una escalera de peso molecular en el pocillo de la izquierda y la banda de desmogleína-2 a la derecha con un peso molecular de 115 kDa. Se cortaron transferencias en dos secciones de pocillos, como antes, de diferentes geles antes de la exposición con cada suero canino individual. Las transferencias Western (recortadas y no recortadas) para todos los perros del estudio se muestran en las Figs. S3-S12.

Las concentraciones séricas de autoanticuerpos contra la desmongleína-2 se midieron indirecta y semicuantitativamente mediante densitometría. La señal densitométrica se normalizó a las concentraciones de globulina en suero. No hubo diferencias significativas en las concentraciones de anticuerpos anti-desmogleína-2 entre ninguno de los grupos de estudio, tanto cuando se compararon las densidades sin procesar (p = 0,0992) como las densidades normalizadas (p = 0,074). Las densidades de bandas por grupo se muestran en la Fig. 3. Las densidades brutas se correlacionaron débilmente con la concentración de globulina (r = 0,295, IC − 0,004–0,55; p = 0,0465) en todos los perros. La expresión de autoanticuerpos no se correlacionó significativamente con el peso corporal (r bruto = 0,13, p = 0,129; r normalizado = − 0,22, p = 0,143) ni con la edad (r bruto = 0,13, p = 0,380; r normalizado = − 0,025, p = 0,871).

Gráficos de violín que muestran las densidades de anticuerpos anti-desmogleína-2 crudas y normalizadas por grupo. El ancho de cada parcela es proporcional al número de puntos en esa densidad. La línea superior dentro de cada gráfico representa el rango del primer cuartil, la línea del medio representa la mediana y la línea inferior representa el rango del primer cuartil. ARVC ARVC perros Boxer, HB perros Boxer sanos, D Doberman Pinschers con DCM, M perros pequeños con MMVD, C perros sanos no Boxer.

Al considerar solo los tres grupos de perros con enfermedad cardíaca (bóxer ARVC, dóberman pinscher con DCM y perros MMVD), la expresión de anticuerpos anti-desmogleína-2, tanto normal como cruda, se correlacionó significativamente con el tamaño de la cámara del ventrículo izquierdo (medido como normalizado interno del ventrículo izquierdo). dimensión en diástole, LVIDDn). Sin embargo, la expresión de autoanticuerpos no se correlacionó significativamente con el tamaño de la aurícula izquierda (medido como la proporción de aurícula izquierda a aorta en el eje corto, LA:Ao). Además, cuando se evaluó la carga de ectopia ventricular del grupo ARVC Boxer en función de AECG, hubo una fuerte correlación significativa de las densidades de banda normalizadas y sin procesar con la complejidad de VE en el AECG de cada perro en el momento del diagnóstico, pero no con la carga total de VE. La Tabla 3 muestra los coeficientes de correlación y los valores de p para estas evaluaciones.

Este estudio es el primero en evaluar la presencia de autoanticuerpos contra la proteína desmosómica, desmogleína-2, en perros de varias razas y con enfermedades cardíacas. Nuestros resultados indican que los anticuerpos anti-desmogleína-2 están presentes en todos los perros, independientemente de la raza o la enfermedad cardíaca. Específicamente, se detectaron anticuerpos en Boxers con ARVC, Boxers sanos, Doberman Pinschers con DCM, varias razas pequeñas de perros con MMVD y varias razas sanas de perros. No se encontró correlación entre la expresión de anticuerpos anti-desmogleína-2 y la edad o el peso corporal del perro de estudio. Además, no se encontraron diferencias significativas entre los grupos de enfermedades del estudio y la expresión de anticuerpos. Estos hallazgos indican que es poco probable que los anticuerpos anti-desmogleína-2 tengan utilidad como prueba de diagnóstico para ARVC en boxers, ya que no son específicos de la enfermedad y se encontraron repetidamente en perros sanos.

Nuestros hallazgos difieren de los de dos estudios previos que evaluaron la autoinmunidad en CAVD humana, uno de los cuales (Chatterjee et al.) evaluó específicamente tanto a pacientes humanos como a perros Bóxer en cuanto a la presencia de anticuerpos anti-desmogleína-214,15. Si bien nuestros resultados indican que los anticuerpos anti-desmogleína-2 están presentes en los boxeadores con ARVC, también encontramos que están presentes de manera constante en los boxeadores sanos y en los no boxeadores sanos. Esto contrasta con los dos estudios de Chatterjee et al. y Caforio et al., que encontraron concentraciones significativamente más frecuentes y mayores de autoanticuerpos en personas afectadas con ARVC en comparación con controles sanos. Un estudio más reciente que evaluó a atletas humanos sanos con agrandamiento fisiológico del ventrículo derecho encontró que los anticuerpos anti-desmogleína-2 no estaban presentes, lo que indica además que pueden desempeñar un papel patológico22. Sin embargo, Caforio et al. también evaluó a familiares sanos de personas con ARVC y pacientes con enfermedad cardíaca no inflamatoria e isquémica, así como a donantes de sangre sanos no emparentados, y se encontró que los anticuerpos anti-corazón y anti-disco intercalado estaban presentes en algunos de estos pacientes, aunque con menor frecuencia en comparación con pacientes con ARVC y familiares afectados. Además, mientras Chaterjee et al. encontraron que los autoanticuerpos son discriminatorios para ARVC en el perro Boxer, existen diferencias importantes entre sus métodos y el presente estudio. Específicamente, los sueros en su estudio no estaban inhibidos por la proteasa y, lo que es más importante, no alteraron los anticuerpos secundarios utilizados para los sueros de perros, y continuaron usando anticuerpos secundarios de cabra antihumanos para sondear transferencias en lugar de anticuerpos específicos caninos. Además, no se indicó de dónde se obtuvieron los sueros de perros ni durante cuánto tiempo se almacenaron antes del análisis. Finalmente, se brindó poca información sobre las características y los hallazgos clínicos de los Boxers con ARVC y no se proporcionó información sobre su subconjunto de Boxers sanos y perros de razas mixtas. Aquí informamos que se encontraron anticuerpos anti-desmolgein-2 en todos los perros evaluados sin una diferencia significativa en la expresión de anticuerpos entre ninguno de los grupos de estudio. Nuestros hallazgos están alineados con los de un resumen presentado recientemente que evalúa a los boxeadores con ARVC y a los boxeadores sanos para detectar anticuerpos anti-desmogleína-2 e indican que se requiere más investigación en este campo23.

Al igual que en estudios anteriores, en este estudio se encontró una correlación significativa entre las concentraciones de autoanticuerpos y ciertos marcadores de la gravedad de la enfermedad. Nuestros resultados indican que las concentraciones crecientes de anticuerpos anti-desmogleína-2 se correlacionan con el grado de dilatación del ventrículo izquierdo en perros con enfermedad cardíaca estructural, independientemente de si esa enfermedad es ARVC, DCM o MMVD. Dentro del grupo estudiado de Boxers con ARVC, también encontramos una correlación significativa entre la expresión de autoanticuerpos y la complejidad de las arritmias ventriculares, un marcador de un estado de enfermedad más grave. Estos resultados pueden indicar que los anticuerpos anti-desmogleína-2 son una secuela del daño de los cardiomiocitos y, por lo tanto, en un estado de enfermedad más grave, la concentración de autoanticuerpos es mayor. Alternativamente, si juega un papel en la patogénesis de la enfermedad, las concentraciones de autoanticuerpos que son más altas pueden resultar en un empeoramiento del estado de la enfermedad. Nuestro hallazgo de anticuerpos anti-desmogleína-2 consistentemente tanto en perros Bóxer sanos como en perros sanos que no son Bóxer respaldaría la hipótesis anterior, sin embargo, se necesitarían estudios longitudinales con mediciones secuenciales de la expresión de anticuerpos y marcadores de la gravedad de la enfermedad en el mismo individuo para dilucidar esto. .

Hay pruebas significativas de que la inflamación del miocardio y un sistema inmunitario activado desempeñan un papel en la ARVC, pero no está claro si esta inflamación es un insulto provocador, una reacción a la destrucción de los cardiomiocitos o ambas cosas6,16,24. Múltiples modelos de ARVC en animales pequeños implican a la inflamación en la patogenia de la enfermedad25,26,27. Las células inflamatorias, incluidos los linfocitos de células T, los macrófagos, los neutrófilos y los mastocitos, se encuentran comúnmente en el miocardio de las personas con ARVC, especialmente en las regiones afectadas por el cambio fibroadiposo24. Se han encontrado concentraciones más altas de citoquinas inflamatorias circulantes y proteína C reactiva en pacientes con ARVC y asociadas con eventos arrítmicos28,29. La infiltración linfocítica miocárdica también se ha demostrado en boxeadores con ARVC y dicha inflamación se asoció significativamente con perros que experimentaron muerte cardíaca súbita.4 En humanos, se cree que dicha inflamación miocárdica está asociada con la llamada "fase caliente" de la enfermedad en la que los pacientes a menudo se diagnostican erróneamente inicialmente como miocarditis y pueden estar asociadas con arritmias más graves y un mayor riesgo de muerte súbita cardíaca6,30. Una vez más, no está claro si esta inflamación provoca la muerte de los cardiomiocitos y la progresión de la enfermedad o es la reacción del sistema inmunitario a la destrucción de los cardiomiocitos.

Presumimos que los autoanticuerpos contra la desmogleína-2 son una secuela de la muerte de los cardiomiocitos durante la cual se liberan epítopos previamente ocultos o expuestos con poca frecuencia y estimulan una reacción inmunitaria. Nuestros resultados indican que este no es un proceso específico de ARVC o incluso de una patología cardíaca, ya que los perros sanos y los perros con DCM y MMVD también poseían estos anticuerpos. De hecho, un estudio reciente identificó un aumento significativo en los anticuerpos anti-desmogleína-2 en personas recientemente infectadas con COVID-19 en comparación con un grupo de control y pacientes con ARVC31. Fue un hallazgo inesperado que todos los perros sanos en este estudio tenían algún nivel de anticuerpos anti-desmogleína-2, lo que sugiere que cierto grado de estimulación antigénica a las proteínas desmosómicas es normal en los perros. A pesar de su inmensa importancia en la integridad estructural y la función celular, el desmosoma sigue siendo una estructura dinámica con un recambio frecuente de proteínas desmosómicas en la salud32. Nuestros resultados indican una débil correlación entre la concentración de autoanticuerpos y la dilatación del ventrículo izquierdo y una fuerte correlación entre las concentraciones de autoanticuerpos y la complejidad de la EV. Estos hallazgos juntos sugieren que las concentraciones de autoanticuerpos aumentan con el aumento de la gravedad de la enfermedad. Es posible que tales elevaciones se correlacionen con la "fase caliente" de ARVC en perros Boxer y podrían indicar un empeoramiento de las arritmias. Si bien no encontramos una correlación significativa entre los latidos VE totales y la expresión de autoanticuerpos, muchos de los boxeadores en nuestro grupo de estudio ya estaban en tratamiento antiarrítmico y posiblemente en una etapa de la enfermedad mejor controlada o menos inflamatoria, lo que dificulta la evaluación. Un estudio longitudinal podría evaluar mejor cómo cambian las concentraciones de autoanticuerpos con la mejora o el empeoramiento de las arritmias ventriculares.

Las limitaciones de este estudio incluyen el pequeño número de perros en cada grupo de estudio. Esto podría haber resultado en un error de tipo II y, por lo tanto, es posible que con una población de estudio más grande, se encuentre una diferencia en la expresión de autoanticuerpos entre los grupos de estudio. Además, si bien los Boxers sanos fueron examinados minuciosamente para detectar cualquier enfermedad cardíaca, es posible que algunos de los perros incluidos pudieran desarrollar ARVC más adelante en la vida o incluso que ya albergaran un estado de enfermedad oculta a nivel molecular o celular. Además, los perros incluidos en los grupos ARVC, DCM y MMVD fueron reclutados de la clínica y, por lo tanto, los diagnósticos realizados y los tratamientos para estos perros fueron heterogéneos y a discreción del médico tratante. En particular, el momento en que se instituyó la terapia antiarrítmica y el fármaco elegido dependieron del médico. Además, varios individuos realizaron y analizaron AECG y ecocardiogramas, lo que puede haber introducido cierta variabilidad. A un perro dentro del grupo ARVC (ARVC-5) no se le realizó un AECG simultáneamente con la recolección de suero, lo que podría haber afectado la precisión de una correlación entre la ectopia y la expresión de autoanticuerpos en este perro. La ARVC tipo III es difícil de diagnosticar, ya que otras fenocopias pueden presentarse de manera similar. Es posible que los dos boxeadores con ARVC tipo III incluidos en este estudio tuvieran otra etiología para su fenotipo de DCM. Como los resultados de nuestro estudio muestran que los anticuerpos anti-desmogleína-2 no son específicos de la enfermedad, incluso si se clasificaron erróneamente, esto no habría afectado significativamente nuestras conclusiones generales. Los perros también se inscribieron en varias etapas de sus respectivas enfermedades, ya sea en el primer diagnóstico o en una nueva visita de control, y es posible que la expresión de autoanticuerpos cambie con la progresión de la enfermedad, como se destaca en nuestra discusión. Nuevamente, los estudios longitudinales serían útiles para determinar cómo cambian los niveles de anticuerpos anti-desmogleína-2 dentro del individuo y cómo estos cambios se correlacionan con la progresión de la enfermedad. La detección de autoanticuerpos contra nuestra proteína diana se midió indirectamente mediante transferencia Western, que es de naturaleza semicuantitativa y está sujeta a muchas variabilidades analíticas. Otros métodos más cuantitativos y repetibles, como ELISA o los inmunosensores, pueden arrojar resultados más uniformes, pero no están disponibles comercialmente para su uso en perros. Por último, aunque la medición de las densidades de las bandas se realizó de manera ciega, todos los demás análisis no lo fueron y, por lo tanto, podrían haber introducido un sesgo no deseado.

En conclusión, informamos el primer estudio veterinario que evalúa a los perros en busca de autoanticuerpos contra la desmogleína-2. Nuestros hallazgos indican que estos autoanticuerpos están presentes tanto en la enfermedad cardíaca como en la salud en una variedad de razas caninas. Se encontraron anticuerpos anti-desmogleína-2 en todos los perros evaluados, incluidos los bóxers con ARVC, los dóberman pinscher con DCM, los perros de razas pequeñas con MMVD y las razas bóxer y no bóxer sanas. Hubo una débil correlación entre la expresión de autoanticuerpos y el grado de dilatación del ventrículo izquierdo en perros con enfermedad cardiaca y una fuerte correlación con la complejidad de las arritmias ventriculares en Boxers con ARVC. En conjunto, esto sugiere que las concentraciones de autoanticuerpos coinciden con la gravedad de la enfermedad y pueden servir como un biomarcador para el empeoramiento de la remodelación ventricular o las arritmias; sin embargo, se necesitan estudios más amplios para evaluar mejor esto.

Este estudio fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC: 21984) de la Universidad de California, Davis. Los métodos se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices de la universidad, el protocolo del comité IACUC aprobado y las directrices y reglamentos ARRIVE. Los animales utilizados en este estudio fueron perros propiedad de clientes reclutados en el Hospital Docente de Medicina Veterinaria Davis de la Universidad de California. Los perros fueron reclutados e inscritos prospectivamente en el estudio entre noviembre de 2020 y julio de 2022 y comprendían cinco grupos diferentes: (1) perros boxer con diagnóstico de ARVC; (2) perros Boxer (HB) sanos; (3) Doberman Pinschers con diagnóstico de DCM; (4) perros de razas pequeñas (< 15 kg) con diagnóstico de MMVD y (5) perros sanos que no sean Boxer. Todos los propietarios fueron informados de los requisitos del estudio y se obtuvo el consentimiento por escrito para cada participante del estudio. Todos los perros Boxer fueron genotipados para la mutación del gen de la estriatina. Doberman Pinschers fueron genotipados para las mutaciones DCM1 (gen PDK4) y DCM2 (gen titina). Todas las pruebas genéticas fueron realizadas por el Laboratorio de Genética Cardíaca Veterinaria de la Universidad Estatal de Carolina del Norte.

El médico tratante realizó un diagnóstico de ARVC en Boxers para cada caso en función de una combinación de signos clínicos, genotipo, hallazgos de ECG, ecocardiografía y resultados de ECG ambulatorio (AECG) de 24 horas. Los criterios de inclusión para el grupo ARVC Boxer fueron raza Boxer de raza pura, un estado de mutación de estriatina positivo (heterocigoto u homocigoto) y al menos uno de los siguientes: (1) > 300 VPC en AECG de 24 h, (2) arritmias ventriculares malignas que justifiquen terapia antiarrítmica antes de AECG, y/o (3) un ventrículo izquierdo dilatado y poco contráctil en el ecocardiograma. Por lo tanto, los perros podrían clasificarse en ARVC de tipo II (únicamente arritmogénico) o ARVC de tipo III (fenotipo de miocardiopatía dilatada +/− arritmias). Los perros debían haber tenido al menos un ECG y un ecocardiograma para estar incluidos. En la universidad estudiada, el estándar de atención es realizar AECG antes de la terapia antiarrítmica, a menos que el ECG en el hospital muestre series de taquicardia ventricular a una frecuencia cardíaca superior a 180 lpm, fenómeno R sobre T y/o el perro tuviera síncope. Los perros fueron excluidos si tenían cualquier otro diagnóstico ecocardiográfico hemodinámicamente significativo (incluidas enfermedades congénitas o adquiridas y masas cardíacas) o si el estudio sistémico reveló otra posible etiología de arritmias ventriculares o un fenotipo de miocardiopatía dilatada.

Los boxeadores clínicamente sanos fueron reclutados activamente de la clientela y el personal del hospital. Los criterios de inclusión fueron una mutación de estriatina negativa, ecocardiograma normal, ECG de superficie de cinco minutos normal y < 100 VPC individuales en AECG de 24 h. Todos los ecocardiogramas, ECG y análisis de AECG de boxeadores sanos fueron realizados por un único investigador (ALW). Doberman Pinschers fueron diagnosticados con miocardiopatía dilatada, con o sin insuficiencia cardíaca congestiva secundaria, por el médico tratante de cada caso. El diagnóstico de MCD se realizó en base a los resultados del ecocardiograma, ECG y AECG de acuerdo con las pautas actuales de la Sociedad Europea de Cardiología Veterinaria33. Los perros que pesaban menos de 15 kg se inscribieron en el grupo de MMVD si tenían un diagnóstico de MMVD y se clasificaron de acuerdo con la declaración de consenso de ACVIM como estadio B2 o C según la ecocardiografía realizada por el médico tratante34. Para los grupos de DCM y MMVD, se realizó un diagnóstico de insuficiencia cardíaca congestiva secundaria basado en la presencia de edema pulmonar en las radiografías torácicas y signos clínicos concurrentes (taquipnea, disnea y/o tos). Cuando estaban presentes, el tipo y la gravedad de las arritmias se registraron para cada caso en los grupos DCM y MMVD.

Se reclutaron para el estudio perros clínicamente sanos de varias razas que no eran Boxer entre la clientela y el personal del hospital. Los perros de cualquier edad y raza eran elegibles. Todos los perros se sometieron a un ecocardiograma completo, ECG de 5 min y AECG de 24 h. Cualquier diagnóstico ecocardiográfico que no fuera insuficiencia valvular trivial dio lugar a la exclusión. Tanto los ECG como los AECG debían ser normales. Los ecocardiogramas, ECG y AECG para este grupo fueron realizados por un solo investigador (ALG).

Todos los ecocardiogramas del estudio fueron realizados por un cardiólogo veterinario certificado por la junta o un residente de cardiología veterinaria bajo la supervisión directa de un cardiólogo veterinario certificado por la junta. Las imágenes ecocardiográficas fueron revisadas por un solo investigador (ALW) para todos los perros incluidos en el estudio. Los perros fueron excluidos de cualquier grupo si se sabía que tenían un proceso de enfermedad neoplásico, inmunomediado o infeccioso. También se excluyeron los perros que recibieron corticosteroides sistémicos u otros fármacos inmunosupresores.

A todos los perros del grupo ARVC que sobrevivieron hasta el alta se les realizó al menos un AECG de 24 horas. Los datos de AECG previos, si se realizaron, también fueron recopilados y revisados por un solo investigador (ALW). A todos los perros Bóxer sanos y no Bóxer sanos se les colocó un AECG de detección de 24 horas como parte del estudio. Los AECG no se analizaron para Dobermans con DCM o perros dentro del grupo MMVD. Los AECG se realizaron al mismo tiempo que el muestreo de suero en todos los perros menos uno; un perro en el grupo ARVC Boxer (ARVC-5) solo tenía resultados previos de AECG de 14 meses y 3 años antes. Todos los AECG se analizaron prospectivamente utilizando los sistemas de software Vision 5 (Mortara Instrument, Inc.) o Trillium (Forest Medical, LLC). El software anota automáticamente complejos normales y anormales; sin embargo, todas las grabaciones se inspeccionaron visualmente y todos los latidos mal etiquetados se corrigieron para determinar con precisión la frecuencia y la complejidad de la ectopia, si la hubiera. Las partes de las grabaciones con artefactos relacionados con el movimiento que eran lo suficientemente importantes como para impedir una interpretación precisa se etiquetaron como artefactos y no se cuantificaron para el análisis. Se registraron los números totales de latidos ectópicos supraventriculares y ventriculares. Además, las arritmias supraventriculares y ventriculares se clasificaron con base en una escala de complejidad: 0 = sin arritmias presentes, 1 = solo complejos prematuros únicos, 2 = pares, 3 = trillizos o 4 = ≥ 4 latidos ectópicos consecutivos35,36. Las arritmias ventriculares se clasificaron en función de la frecuencia cardíaca (FC) instantánea en complejos prematuros (FC ≥ 160), idioventriculares acelerados (FC = 100-159) o de escape (FC ≤ 99 lpm). Esta escala de complejidad para ectopia también se aplicó a los resultados de AECG de los boxeadores con ARVC a los que se les realizaron y analizaron AECG fuera del sitio.

Se realizó una única extracción de sangre para cada sujeto. Se usaron tubos de recolección sin aditivos, y la sangre se dejó coagular y luego se centrifugó inmediatamente a 3000 rpm (1734 G) durante 15 minutos para separar el suero. El suero se dividió en alícuotas en cantidades de 500 ul con 5 ul de un inhibidor de proteasa comercial añadido y se colocó en crioviales para su almacenamiento. Todas las muestras se almacenaron a -80 grados Celsius hasta que se usaron para el análisis de transferencia Western. Las concentraciones de globulina se obtuvieron para cada perro del estudio usando también suero. La medición de todas las concentraciones de globulina se realizó en el laboratorio de diagnóstico clínico del Hospital Docente de Medicina Veterinaria de UC Davis (sistema Roche cobas c501).

La proteína desmogleína-2 humana recombinante (DSG2-1601H, Creative Biomart, Shirley, NY) se reconstituyó según las instrucciones del fabricante y se diluyó a una concentración de 100 ng/ul con la adición de inhibidor de proteasa 1X (inhibidor de proteasa Thermo Fischer Scientific Halt). A continuación, la proteína reconstituida se dividió en alícuotas y se almacenó a -80 °C en crioviales para su posterior análisis.

La validación inicial de la detección de proteínas se realizó utilizando anticuerpos monoclonales de conejo anti-desmogleína-2 (anticuerpo DSG2, Abcam, Waltham, MA) seguido de IgG anti-conejo de cabra conjugada con peroxidasa de rábano picante (Abcam, Waltham, MA) como anticuerpos secundarios. Tras la validación de la proteína desmogleína-2 recombinante, se llevó a cabo la optimización de la detección de proteínas utilizando varias concentraciones de anticuerpos primarios y secundarios y cantidades de proteína recombinante. Sobre la base de los resultados de estas transferencias de optimización, se desarrolló el protocolo para el análisis de transferencia Western de muestras de estudio.

Todas las muestras del estudio se analizaron utilizando un protocolo estandarizado en un solo laboratorio. Las proteínas desmogleína-2 recombinantes (Bio-Rad, Hercules, CA) primero se desnaturalizaron y redujeron hirviéndolas en 1 × tampón Laemmli con 2-mercaptoetanol. Se cargó un total de 375 ng de proteína desmogleína-2 recombinante en cada pocillo de geles prefabricados de poliacrilamida al 4-20 % (geles Mini-protean TGX, BioRad, Hercules, CA), alternando con la carga de una escalera de proteína (BioRad, Hercules, CA). CA) y separados por SDS-PAGE antes de transferirlos a una membrana de difluoruro de polivinilideno (Immun-blot, BioRad, Hercules, CA) a 60 V durante 70 min. Se confirmó la transferencia adecuada de proteínas a través de la solución Ponceau S (Sigma Aldrich, St. Louis, MO). A continuación, las transferencias se bloquearon con albúmina de suero bovino (BSA) al 10 % en solución salina tamponada con Tris con Tween al 0,05 % (TBST) (durante la noche, 4 °C). Luego, las transferencias se recortaron en secciones para que cada carril que contenía la proteína recombinante se emparejara con una escalera de proteína. Los sueros caninos se descongelaron a temperatura ambiente y se diluyeron 1:100 en TBST con BSA al 5%. Luego, las transferencias cortadas se incubaron en sueros de un solo individuo de estudio durante dos horas a temperatura ambiente, seguido de lavado e incubación corporal secundaria con anticuerpo secundario de conejo anti-perro (1:20,000, Abcam, 136759) durante una hora a temperatura ambiente . Después del lavado, las bandas inmunorreactivas se detectaron usando un kit de quimioluminiscencia mejorado (Prometheus ProSignal Dura, Genesee Scientific, El Cajon, CA) y se tomaron imágenes usando un sistema de imágenes disponible comercialmente (sistema ProteinSimple FluorChem E) con una exposición de 60 s. A continuación, las bandas detectadas se cuantificaron mediante densitometría utilizando el software ImageJ, corrigiendo la densidad de fondo de cada transferencia por un solo investigador de manera ciega.

Las densidades de banda se presentan como la densidad medida sin procesar y como un valor normalizado. La normalización de la densitometría se calculó usando la concentración de globulina medida de cada perro y usando la fórmula:

Se analizó la normalidad de las características del perro de estudio (peso corporal, edad, concentración de globulina) y las densidades brutas y normalizadas mediante la prueba de D'Agostino y Pearson. Los datos normalmente distribuidos y los datos no paramétricos se muestran como media (+ /− SD) y mediana [IQR], respectivamente. Las diferencias entre grupos para datos discretos numéricos se probaron mediante un ANOVA unidireccional para datos distribuidos normalmente o una prueba de Kruskal-Wallis para datos no paramétricos. Se realizaron pruebas de correlación para las densidades tanto cruda como normalizada utilizando una prueba de Spearman y se informan el coeficiente de correlación y el valor p. Se consideró significación un valor de p < 0,05.

Los conjuntos de datos utilizados y/o analizados durante el estudio actual están disponibles del autor correspondiente a pedido razonable.

Meurs, KM Miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho en el perro boxer: una actualización. Veterinario. clin. am del norte Pequeño Animado Practica 47, 1103–1111 (2017).

Artículo PubMed Google Académico

Meurs, KM et al. Historia natural de la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho en el perro boxer: un estudio prospectivo. J. Vet. Interno. Medicina. 28, 1214–1220 (2014).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Meurs, KM et al. Asociación de miocardiopatía dilatada con el genotipo de mutación de estriatina en perros boxer. J. Vet. Interno. Medicina. 27, 1437–1440 (2013).

Artículo ADS CAS PubMed Google Scholar

Basso, C. et al. Miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho que causa muerte cardíaca súbita en perros boxer: un nuevo modelo animal de enfermedad humana. Circulación 109, 1180–1185 (2004).

Artículo PubMed Google Académico

Vischer, AS et al. Miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho en perros Boxer: El diagnóstico como vínculo con la enfermedad humana. Acta Myol. 36, 135–150 (2017).

PubMed PubMed Central Google Académico

Cicenia, M. & Drago, F. Miocardiopatía arritmogénica: Diagnóstico, evolución, estratificación de riesgo y población pediátrica—¿Dónde estamos?. J. Cardiovasc. desarrollo Dis. https://doi.org/10.3390/jcdd9040098 (2022).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Oxford, EM et al. Composición molecular del disco intercalado en un modelo animal canino espontáneo de displasia/miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. Ritmo cardíaco 4, 1196–1205 (2007).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Oxford, EM et al. Cambios ultraestructurales en miocitos cardíacos de perros Boxer con miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. J. Vet. Cardiol. 13, 101–113 (2011).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Meurs, KM et al. La asociación del genoma completo identifica una deleción en la región 3' no traducida de la estriatina en un modelo canino de miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. Tararear. Gineta. 128, 315–324 (2010).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Cattanach, BM, Dukes-McEwan, J., Wotton, PR, Stephenson, HM y Hamilton, RM Una evaluación genética basada en el pedigrí de Boxer ARVC y el papel de la mutación Striatin. Veterinario. rec. 176, 492 (2015).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ohno, S. Los antecedentes genéticos de la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. J. Arritmo. 32, 398–403 (2016).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Mattesi, G., Zorzi, A., Corrado, D. & Cipriani, A. Historia natural de la miocardiopatía arritmogénica. J. Clin. Medicina. 9, 878 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Paul, M. & Schulze-Bahr, E. Miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho: evolución de características clínicas únicas a un concepto fisiopatológico complejo. Hertz 45, 243–251 (2020).

Artículo PubMed Google Académico

Chatterjee, D. et al. Un autoanticuerpo identifica la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho y participa en su patogenia. EUR. Corazón J. 39, 3932–3944 (2018).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Caforio, ALP et al. Evidencia de estudios familiares de autoinmunidad en la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. Circulación 141, 1238–1248 (2020).

Artículo PubMed Google Académico

Meraviglia, V., Alcalde, M., Campuzano, O. & Bellin, M. La inflamación en la patogenia de la miocardiopatía arritmogénica: ¿evento secundario o conductor activo?. Frente. Cardiovasc. Medicina. https://doi.org/10.3389/fcvm.2021.784715 (2021).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Nikolaev, VO et al. Un nuevo método de fluorescencia para la detección rápida de autoanticuerpos funcionales del receptor beta1-adrenérgico en la insuficiencia cardíaca. Mermelada. Col. Cardiol. 50, 423–431 (2007).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Wallukat, G., Nissen, E., Morwinski, R. & Müller, J. Autoanticuerpos contra los receptores beta y muscarínicos en la cardiomiopatía. Hertz 25, 261–266 (2000).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Wess, G. et al. Los doberman pinscher presentan autoinmunidad asociada con autoanticuerpos funcionales: un modelo para estudiar los antecedentes autoinmunes de la miocardiopatía dilatada humana. PLoS ONE 14, 1–19 (2019).

Artículo Google Académico

Jahns, R. et al. Los autoanticuerpos que activan los receptores 1-adrenérgicos humanos están asociados con una función cardíaca reducida en la insuficiencia cardíaca crónica. http://www.circulationaha.org (1999).

Becker, N.-P., Goettel, P., Mueller, J., Wallukat, G. & Schimke, I. Enfermedades por autoanticuerpos funcionales: fundamentos y tratamiento relacionados con las miocardiopatías. Frente. Biosci. (Landm. Ed.) 24, 48–95 (2019).

Artículo Google Académico

Dorian, D. et al. Un nuevo biomarcador de miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho (ARVC), Anti-DSG2, está ausente en atletas con agrandamiento del ventrículo derecho. CJC Abierto 3, 1413–1418 (2021).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

dos Santos, L., Cunningham, S., Hamilton, R. & Fatah, M. Anticuerpo antidesmosómico como biomarcador potencial de carga de arritmia en boxeadores con miocardiopatía ventricular arritmogénica. 2022 Preimpresión del programa de resúmenes de investigación del Foro ACVIM en (2022).

Campuzano, O. et al. Miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho: Alteraciones estructurales severas se asocian con inflamación. J. Clin. Patol. 65, 1077 (2012).

Artículo PubMed Google Académico

Lubos, N. et al. La inflamación da forma a la patogenia de la miocardiopatía arritmogénica murina. Res. Básica Cardiol. 115, 42 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Asimaki, A. et al. Identificación de un nuevo modulador del disco intercalado en un modelo de pez cebra de miocardiopatía arritmogénica. ciencia Traducir Medicina. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3008008 (2014).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Chelko, SP et al. Modulación terapéutica de la respuesta inmune en la miocardiopatía arritmogénica. Circulación 140, 1491–1505 (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Asimaki, A. et al. Proteínas desmosómicas alteradas en la miocarditis granulomatosa y posibles vínculos patogénicos con la miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho. Circ Arrhythm Electrofisiol. 4, 743–752. https://doi.org/10.1161/CIRCEP.111.964890 (2011).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Bonny, A. et al. Proteína C reactiva en displasia arritmogénica de ventrículo derecho/miocardiopatía y relación con taquicardia ventricular. Cardiol. Res. Practica https://doi.org/10.4061/2010/919783 (2010).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Bariani, R. et al. Episodios similares a miocarditis en pacientes con miocardiopatía arritmogénica: una revisión sistemática sobre la llamada fase caliente de la enfermedad. Biomoléculas https://doi.org/10.3390/biom12091324 (2022).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Lee, ECY et al. Alta frecuencia de anticuerpos anti-DSG 2 en muestras de suero post COVID-19. J. Mol. Cardio celular. 170, 121–123 (2022).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Windoffer, R., Borchert-Stuhlträger, M. & Leube, RE Desmosomas: estructuras dependientes de calcio interconectadas de notable estabilidad con una importante renovación de proteínas de membrana integral. J. ciencia celular. 115, 1717–1732 (2002).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Wess, G., Domenech, O., Dukes-McEwan, J., Häggström, J. & Gordon, S. Directrices de detección de cardiomiopatía dilatada en dóberman pinscher de la sociedad europea de cardiología veterinaria. J. Vet. Cardiol. 19, 405–415. https://doi.org/10.1016/j.jvc.2017.08.006 (2017).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Keene, BW et al. Pautas de consenso de ACVIM para el diagnóstico y tratamiento de la enfermedad mixomatosa de la válvula mitral en perros. J. Vet. Interno. Medicina. 33, 1127–1140 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Ueda, Y. et al. Frecuencia cardíaca y variabilidad de la frecuencia cardíaca de macacos rhesus (Macaca mulatta) afectados por hipertrofia ventricular izquierda. Frente. Veterinario. ciencia 6, 1–11 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Walker, AL, Ueda, Y., Crofton, AE, Harris, SP y Stern, JA Electrocardiografía ambulatoria, variabilidad de la frecuencia cardíaca y pruebas de estrés farmacológico en gatos con miocardiopatía hipertrófica subclínica. ciencia Rep. https://doi.org/10.1038/s41598-022-05999-x (2022).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Descargar referencias

Este estudio fue apoyado por una subvención del Centro de Salud de Animales de Compañía en la Escuela de Medicina Veterinaria de UC Davis. También nos gustaría agradecer a los médicos y al personal del Servicio de Cardiología del Hospital de Enseñanza Médica Veterinaria de UC Davis que ayudaron en este proyecto de investigación.

Este trabajo fue financiado por Center for Companion Animal Health, University of California, Davis, 2020-45-R.

William R. Pritchard Veterinary Medical Teaching Hospital, Universidad de California, Davis, CA, EE. UU.

Ashley L. Walker

Departamento de Ciencias Quirúrgicas y Radiológicas, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de California, Davis, CA, EE. UU.

Ronald HL Li y Nghi Nguyen

Departamento de Medicina y Epidemiología, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de California-Davis, 2108 Tupper Hall, Davis, CA, 95616-8732, EE. UU.

Carina E. Jauregui, Allison L. Gagnon y Joshua A. Stern

Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Estatal de Carolina del Norte, Raleigh, NC, 27604, EE. UU.

Kathryn M. morir

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ALW, JAS, KMM y RHL fueron los responsables del diseño del estudio. La investigación y el análisis de datos fueron realizados por ALW, RHL, NN, CJ, ALG y JASKMM realizaron los análisis genéticos. El análisis estadístico fue realizado por ALW y JAS La preparación del manuscrito fue realizada por ALW y JAS El manuscrito final fue editado y aprobado por todos los autores.

Correspondencia a Joshua A. Stern.

Las pruebas genéticas utilizadas en este estudio fueron proporcionadas sin costo alguno por uno de los autores del estudio (KMM). KMM es el PI de un laboratorio de genética cardíaca que ofrece pruebas genéticas disponibles comercialmente, sin fines de lucro, en animales de compañía. Si bien las pruebas genéticas se utilizaron como criterio de inclusión en la población estudiada, el uso de dichas pruebas no influyó en los resultados del estudio ni en las conclusiones extraídas de estos resultados. KMM no se incluyó en el análisis estadístico ni en la interpretación de datos. Todos los demás autores declaran no tener conflictos de interés.

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Walker, AL, Li, RHL, Nguyen, N. et al. Evaluación de autoanticuerpos contra desmogleína-2 en perros con y sin enfermedad cardíaca. Informe científico 13, 5044 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-32081-x

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Recibido: 18 diciembre 2022

Aceptado: 22 de marzo de 2023

Publicado: 28 de marzo de 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-32081-x

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